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Clover®酶聯(lián)免疫試劑盒預實驗的必要性，通過預實驗可以熟悉整個實驗的流程，發(fā)現(xiàn)可能忽略的問題；可以測試樣本和試劑盒是否匹配，一旦出現(xiàn)不匹配的情況，不至于浪費過多樣本；可以對樣品中目的分析物的濃度作一下大致參考，以確定合適稀釋度。

　　一、Clover®酶聯(lián)免疫試劑盒使用注意事項：

1. 室溫低于20℃或試劑及樣品未回到室溫（20- 25℃）會導致數(shù)值偏低。

2. 在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥過久的情況，則會出現(xiàn)標準曲線不成線性，重復性不好的現(xiàn)象。所以洗板排干后應立即進行下一步操作。

3. 標準物質和顯色液對光敏感，避免直接暴露在光線下。

4. 混合要均勻，洗板要*（包括加樣品和標準液的時候都必需充分混合均勻）。

5. 終止液為強酸性物質，避免接觸皮膚。

6. 不要使用過了有效期的試劑盒，也不要混合使用不同批次的試劑盒，這樣會引起測定結果不準確。

7. 試劑盒的儲存條件是2-8℃，切勿冷凍。

   　　二、剩余試劑的妥善保存：

   酶聯(lián)免疫試劑盒恢復至室溫后，取出要使用的酶標板孔，未使用的酶標板孔應及時放回鋁箔袋，加入干燥劑，封緊封口，冷藏保存。

   試劑盒常用檢測方法簡介

   ELISA試劑盒一般適合樣品檢測量大，實驗室中常用于初篩的檢測方法。若檢測到陽性樣本，再用確認方法做準確定量。

   試劑盒檢測方法及優(yōu)點介紹：

   A、間接法：此測定方法與直接法類似，差別在于一級抗體沒有酶標記，改用酶標記的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。

   優(yōu)勢：二抗可以加強信號，而且有多種選擇能做不同的測定分析，不加酶標記的一級抗體則能保留它最多的免疫反應性。

   B、直接法：將抗原直接固定在固相載體上，加入酶標記的一級抗體，即可測定抗原總量，此一級抗體的特異性非常重要。

   優(yōu)勢：操作手續(xù)簡短，因無須使用二抗可避免交互反應。

   C、雙抗體夾心法：被檢測的抗原包被在兩個抗體之間，其中一個抗體將抗原固定于固相載體上，即捕捉抗體，另一個則是檢測抗體，此抗體可用酶標記后直接測定抗原的量，或不標記，再透過酶標記的二級抗體來測定抗原的量，這兩種抗體必須小心選取，才可避免交互反應或競爭相同的抗原結合部位。